ڪيئن بهتر ڪنسنٽريشن جو تعين ڪرڻ لاء؟
Inducer IPTG (isopropyl-beta-d-thiogalactoside) لاءِ، ڪنسنٽريشن جيترو وڌيڪ هوندو، اوترو بهتر.بهترين ڪنسنٽريشن جو دارومدار مخصوص تجرباتي حالتن ۽ گهربل انڊڪشن اثر تي هوندو آهي.
عام طور تي، IPTG جو ڪنسنٽريشن 0.1-1 ايم ايم جي حد ۾ استعمال ٿيندو آهي.گھٽ ڪنسنٽريشن سيل جي واڌ تي خراب اثرات کي گھٽائي سگھي ٿو ۽ ٽارگيٽ پروٽين جي اوور ايڪسپريشن جي ڪري سائٽوٽوڪسائيٽي کي گھٽائي سگھي ٿو.وڌيڪ ڪنسنٽريشن شايد سيل جي ميٽابولڪ بوجھ کي وڌائي سگھي ٿي، سيل جي واڌ ۽ اظهار جي ڪارڪردگي کي متاثر ڪري ٿو.
بهترين ڪنسنٽريشن کي طئي ڪرڻ جو طريقو مختلف ڪنسنٽريشن تي IPTG انڊڪشن ٽيسٽ ذريعي ٽارگيٽ پروٽين جي اظهار جي سطح جو اندازو لڳائي سگهجي ٿو.ننڍي پيماني تي ڪلچر ٽيسٽ IPTG ڪنسنٽريشن جي حد تائين استعمال ڪري سگھجن ٿيون (مثال طور 0.1 ايم ايم، 0.5 ايم ايم، 1 ايم ايم، وغيره) ۽ مختلف ڪنسنٽريشن تي اظهار جي اثر جو اندازو لڳائي سگهجي ٿو ٽارگيٽ پروٽين جي اظهار جي سطح کي معلوم ڪندي (مثال طور مغربي. داغ يا فلورسنس جي سڃاڻپ).تجرباتي نتيجن جي مطابق، بهترين اظهار جي اثر سان ڪنسنٽريشن کي بهترين ڪنسنٽريشن طور چونڊيو ويو.
ان کان علاوه، توھان پڻ حوالو ڪري سگھو ٿا لاڳاپيل ادب يا ٻين ليبارٽريز جي تجربي کي سمجھڻ لاءِ عام طور تي استعمال ٿيل IPTG ڪنسنٽريشن رينج کي ساڳي تجرباتي حالتن تحت، ۽ پوءِ تجرباتي ضرورتن جي مطابق اصلاح ۽ ترتيب ڏيو.
اهو نوٽ ڪرڻ ضروري آهي ته مختلف ايڪسپريس سسٽم، ٽارگيٽ پروٽين، ۽ تجرباتي حالتن جي لحاظ کان وڌ کان وڌ ڪنسنٽريشن مختلف ٿي سگهي ٿو، تنهنڪري اهو بهتر آهي ته هر صورت ۾ ڪيس جي بنياد تي بهتر ڪيو وڃي.
پوسٽ جو وقت: سيپٽمبر-28-2023