فينيل گليڪٽوسائيڊ CAS: 2818-58-8

اينزائم جي سرگرمي تي اثر: فينيل گليڪٽوسائيڊ عام طور تي اينزائم β-galactosidase جي سرگرمي کي ماپڻ لاءِ استعمال ڪيو ويندو آهي. جڏهن فينيل گليڪٽوسائيڊ کي β-galactosidase ذريعي هائيڊولائيز ڪيو ويندو آهي، ته اهو پي-نائٽروفينول جاري ڪري ٿو. پي-نائٽروفينول جي جمع کي مقداري طور تي ماپي سگهجي ٿو، جيڪو β-galactosidase جي سرگرمي ۾ بصيرت فراهم ڪري ٿو. هي اثر اينزائم ايسيز ۽ اسڪريننگ سسٽم جهڙن ايپليڪيشنن ۾ استعمال ڪيو ويندو آهي.

جين جي اظهار جو تجزيو: فينيل گليڪٽوسائيڊ اڪثر ڪري ماليڪيولر بائيولاجي تجربن ۾ جين جي اظهار جو مطالعو ڪرڻ لاءِ سبسٽريٽ طور استعمال ڪيو ويندو آهي. lacZ جين، جيڪو β-galactosidase کي انڪوڊ ڪري ٿو، عام طور تي دلچسپي جي ٻين جين جي ريگيوليٽري تسلسل سان ملائي ٿو. lacZ جين جو اظهار ۽ β-galactosidase پاران فينيل گليڪٽوسائيڊ جو هائيڊروليسس مطالعي هيٺ ٽارگيٽ جين جي اظهار جي نموني ۽ سطح کي ظاهر ڪري سگهي ٿو.

اسڪريننگ سسٽم: فينائل گليڪٽوسائيڊ اسڪريننگ سسٽم جو هڪ اهم جزو آهي جيڪو β-galactosidase سرگرمي کي استعمال ڪري ٿو. هڪ وڏي پيماني تي مشهور مثال نيرو-اڇو اسڪريننگ طريقو آهي، جيڪو ماليڪيولر بائيولاجي تجربن ۾ ريڪومبيننٽ يا تبديل ٿيل سيلز کي سڃاڻڻ لاءِ استعمال ڪيو ويندو آهي. ڪالونيون جيڪي ڪاميابي سان ريڪومبيننٽ ڊي اين اي کي اختيار ڪري چڪيون آهن يا جينياتي ريڪومبينيشن مان گذري چڪيون آهن اهي β-galactosidase کي ظاهر ڪنديون، جنهن جي نتيجي ۾ فينائل گليڪٽوسائيڊ جو هائيڊولائيزيشن ۽ نيرو رنگ ٺهندو.

پروٽين صاف ڪرڻ: ڪجهه حالتن ۾، فينائل گليڪٽوسائيڊ کي افينٽي ڪروميٽوگرافي لاءِ ليگنڊ طور استعمال ڪري سگهجي ٿو ته جيئن پروٽين کي صاف ڪري سگهجي جيڪي خاص طور تي β-galactosidase سان ڳنڍيل آهن يا انهن کي چالو ڪيو ويندو آهي. دلچسپي جي پروٽين ۾ هڪ افينٽي ٽيگ يا هڪ فيوزن ٽيگ ٿي سگهي ٿو جنهن ۾ β-galactosidase-binding ڊومين شامل آهي. پروٽين جي مرکب کي هڪ ڪالم ذريعي متحرڪ فينائل گليڪٽوسائيڊ سان گذرڻ سان، گهربل پروٽين کي چونڊيل طور تي برقرار رکي سگهجي ٿو ۽ بعد ۾ ايلوٽ ڪري سگهجي ٿو.